抗体纯化介质的新突破——新一代耐碱protein A

原标题:抗体纯化介质的新突破——新一代耐碱protein A

rProtein A/G在抗体的纯化中具有重要的作用,下图为单抗纯化的通用技术。

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Protein A/G:高效捕获和纯化;

IEC:去除核酸、脱漏Protein A/G和杂质

HIC:去除脱漏Protein A/G、抗体聚集体和杂质)

耐碱Protein A介质有利于延长介质使用寿命,

同时也大大降低了CIP成本。

耐碱的Protein
A介质可以耐受0.1~0.5N的氢氧化钠在位清洗/消毒,大大降低了抗体产品被内毒素污染和批间交叉污染的风险,清洗效果更好,有利于延长介质使用寿命,同时也大大降低了CIP成本。是抗体纯化的利器。

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图|耐碱Protein A亲和介质—技术参数

CIP清洗

森辉的耐碱蛋白A介质载量比国产同类介质高40%,与进口高端介质相当。

耐碱Protein A介质:

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国产介质对照:

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国外在售品牌对照:

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CIP方法:平衡、上样、洗脱、CIP、平衡

Buffer A:20 mM PB+0.15 M NaCl,pH 7.0,Buffer B:0.1 M甘氨酸,pH 3.0

CIP溶液:0.5 M NaOH,15 min

耐碱性

耐碱性强:

采用0.5M NaOH清洗,100次CIP后,载量无明显下降;

耐碱(0.5 M NaOH)性能优异,可满足抗体生产要求。

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新一代耐碱蛋白A介质

我们以配基耐碱和脱落机制研究为基础,进行新一代耐碱蛋白A介质的开发。

脱落机制:

Ø途径1:微球上琼脂糖碎片脱落

Ø途径2:配基脱落

Ø途径3:配基降解

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图|FTIR光谱标准琼脂糖脱落

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图|HPSEC色谱表征配基耐碱性和脱落

设计及应用

配基构建、定点偶联:

Ø 亲和力更强、载量最高

Ø 耐碱性显著提供

高交联微球,强度高、稳定性更好,多次碱洗(CIP)后仍可保持高载量。

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不同基质对CIP清洗(0.5M NaOH)后介质载量的影响

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评价

配基改造和微球强化,产品性能优于行业标杆产品

Ø配基耐碱性:定点突变提高耐碱性

Ø微球强度:高强度提高稳定性

Ø综合性能:载量高、耐碱性好

参考文献:

1.Lan Zhao, Wei Wei, Yongdong Huang,Guanghui Ma. A novel rProtein A
chromatographic media for enhancing cleaning-in-place performance. J
IMMUNOL METHODS 2018, 460,45–50

2.Lan Zhao, Kai Zhu, Yongdong Huang, Guanghui Ma . Enhanced binding by
dextran-grafting to Protein A affinity chromatographic media. J. Sep.
Sci. 2017,40, 1493–1499.返回搜狐,查看更多

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